基因檢測試劑盒使用注意事項(xiàng)

　　基因檢測試劑盒是根據(jù)SRY基因組的特點(diǎn)設(shè)計(jì)生物素標(biāo)記的引物，PCR擴(kuò)增SRY基因目的片段。將SRY基因特異性寡核苷酸探針固定在尼龍膜上。根據(jù)生物素-親和素系統(tǒng)（biotin-avidin system，BAS）原理，將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物與固化在膜條上的探針雜交，洗膜后加入辣根過氧化合物酶標(biāo)記的親和素（POD），與PCR產(chǎn)物上的生物素結(jié)合。加入顯色液（TMB，H2O2），辣根過氧化物酶催化其底物H2O2分解，TMB作為供氫體參與反應(yīng)后產(chǎn)生藍(lán)色的斑點(diǎn)。根據(jù)雜交信號斑點(diǎn)的有無來判斷樣本中是否存在SRY基因。本試劑盒能有效檢測血漿中微量SRY基因。
 
　　基因檢測試劑盒使用注意事項(xiàng)：
　　1、測定中需使用的所有試劑和96孔板提前30min放置室溫溫育（否則會影響試驗(yàn)準(zhǔn)確性），注意12連管必須溫育后再從平板上取下，未使用完的預(yù)包被板條應(yīng)置于有干燥劑的封口袋中密封保存；加樣時(shí)，要注意各成分加入量的準(zhǔn)確。例如，對于加入體積較大的成分來說應(yīng)保證移液器的準(zhǔn)確，而對于加樣量較小的成分，除保證移液器的準(zhǔn)確外，還應(yīng)注意盡量將液體加入已有液體的液面之下，確保成分加入。操作應(yīng)嚴(yán)格按照說明書要求及步驟進(jìn)行，每批實(shí)驗(yàn)應(yīng)保證與陰性對照和陽性對照同時(shí)進(jìn)行檢測與分析，以確保檢測環(huán)境與檢測試劑性能的合格。
　　2、加樣完畢后，依據(jù)試劑盒對應(yīng)耗材選擇正確且匹配的熒光PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)及熒光收集。試劑使用前應(yīng)充分搖勻；
　　3、搖動平板混勻時(shí)注意避免樣品之間交叉污染；
　　4、使用洗滌液漂洗時(shí)，洗滌液需要填滿每個(gè)小孔，進(jìn)行充分漂洗；
　　5、研磨好的樣品如果不能一次全部測量，可以暫時(shí)在4℃避光保存，但是建議在24h內(nèi)測定；
　　6、結(jié)果判讀應(yīng)以陽性對照作為標(biāo)準(zhǔn)，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，結(jié)果判讀請?jiān)诜磻?yīng)終止后15min內(nèi)完成。